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如何篩選藥物

發布時間: 2017-01-10  點擊次數: 2910次

篩選藥物是確定藥物效用*的一步,要知道抗癌藥物或抗體藥物偶聯物篩選測定是確立藥物候選物在殺死癌細胞中的效用的步。然而,整個過程的藥物篩選測定是耗時和繁瑣的。這篇文章的目的是使體外篩選測定更容易。

 

簡單來說,篩選藥物可被分解為3步。

 

步:細胞培養(plate 1)

 

. 仔細選擇目標細胞,來測試化合物的功效。通常,選擇癌細胞系(組織特異性腫瘤類,耐藥/敏感性癌癥)用于藥物篩選。

. 使用96孔板,覆蓋廣泛的濃度范圍。

. 在200μl培養基/孔中保持鋪板密度為5000-20,000個細胞。密度將取決于細胞生長和孵育時間(24,48或72小時)。準備大量的細胞稀釋液。

. 一個96孔板可以測定兩類藥物(藥物1:行A-D,列2-12;藥物2:行E-H,列2-12)中的兩種藥物的測試。

第二步:藥物稀釋 (plate 2)

 

. 這一步需要計算。你需要決定化合物的測試范圍。這通常基于與化合物的抗癌效率/毒性范圍相關的先前報道。如果你是個測試者,簡單地測試3個濃度范圍(如100μM,10μM和1μM)。

. 一旦你知道原始濃度范圍,決定目標細胞能承受的濃度。將該濃度乘以2,即是工作濃度。

第三步:藥物與細胞融合

 

. 棄掉Plate 1的整個培養基。使用多通道移液槍,將95ul新鮮培養基轉移到Plate 1的每個孔中。然后,將95ul上述藥物稀釋物從Plate 2轉移到Plate 1相同(對應)的孔中。這時的陰性對照為:A1,B1,C1,D1;陽性(無藥物)對照為:E1,F1,G1,H1。孵育細胞。

. 一旦孵育完成,使用任何細胞活力/細胞毒性分析來測試候選藥物。

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